Daten aus datei lesen und getriggert auf dig. Port schreiben

Das von dir vermutete Problem kann es eigentlich nicht sein, weil vor der Ausführung von DAQmx Write IMMER erst die komplette Datei eingelesen wird, egal, ob mit Triggersteuerung oder ohne. Das liegt daran, dass erst alle Eingänge eines VIs anliegen müssen, bevor es ausgeführt werden kann.

Eine wesentlich speicherschonendere Methode ist es, das DAQmx Write und das Read From Binary File in einer Schleife anzuordnen und immer nur ein Byte (also genau soviel, wie du an deinen digitalen Output senden willst) einzulesen.
Die Schleifenabbruchbedingung ermittelst du dann aus der Dateigröße und der aktuellen Dateiposition. Dadurch bekommst du raus, ob deine Datei komplett eingelesen ist.

Allerdings habe ich keine Ahnung, wie schnell die Dateioperationen sind. Ob du durch das ständige Einlesen dem DO wirklich so schnell Daten liefern kannst, wie er will? Alternativ eben nicht ein Byte, sondern z.B. 50 in einem Schritt einlesen...